HyPURITY色譜柱的使用壽命和以下因素有關
更新時間:2018-11-08 點擊次數:1838
HyPURITY色譜柱的使用壽命,除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關系外,主要的是與日常的維護密切相關。HyPURITY色譜柱的使用壽命主要是柱效和柱壓兩個指標來衡量,如果一支HyPURITY色譜柱柱效太低或柱壓太高,通常被認為該HyPURITY色譜柱已經結束。因此,延長HyPURITY色譜柱使用壽命的關鍵是,消除引起柱效下降和柱壓升高的因素。以下是HyPURITY色譜柱的日常維護方法:
一、流動相的PH應在使用的范圍內
流動相超過其PH范圍將會導致硅膠基質流失和鍵合相碳鏈斷裂,使柱效下降,使用壽命變短。由于流動相的PH控制不當而對HyPURITY色譜柱造成的損害,通常很難是HyPURITY色譜柱恢復,因此必須認真對待,嚴格控制流動相的PH值。
二、去除樣品和流動相中的固體顆粒
樣品和流動相中含有的固體顆粒物質會堵塞HyPURITY色譜柱篩板,篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高,而且也會引起柱效下降,因為篩板的堵塞會引起液流不均,導致色譜峰型拖尾、變寬,從而使柱效下降。因此,建議使用超純水和色譜純試劑,在分析樣品前對樣品進行針筒過濾,流動相過0.45μm濾膜。
三、使用保護柱或在線過濾器
樣品和流動相經過濾后并不能*消除固體顆粒物質,因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產生固體顆粒物質,這些固體顆粒被流動相帶入HyPURITY色譜柱,堵塞篩板,導致柱壓升高、柱效下降。保護柱和在線過濾器上都有篩板,其孔徑與HyPURITY色譜柱孔徑相同,因此可以阻止固體顆粒物質到達HyPURITY色譜柱,有效防止HyPURITY色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,因此,除對樣品和流動相進行過濾外,建議您在HyPURITY色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器。
如果HyPURITY色譜柱柱壓升高是由于進樣端篩板被堵引起的,可選擇以下方式進行補救:
1.先在HyPURITY色譜柱前加上保護柱或在線過濾器,然后用甲醇、水=20/80ml/min反向沖HyPURITY色譜柱180min.
2.先在HyPURITY色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器,然后反向使用。
四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽通常易溶于水,難溶于有機溶劑,因此緩沖鹽使用不當會使其析出,堵塞填料基質上的微孔和顆粒間的空隙,使填料板結,柱壓上升;同時阻礙了基質上鍵合的碳鏈自由舒展,使HyPURITY色譜柱的保留能力下降,柱效降低。緩沖鹽析出后,去除非常困難,因此,正確的使用緩沖鹽對延長HyPURITY色譜柱使用壽命非常重要。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話:使用前要過濾,使用后要沖洗。
五、防止強保留物質在HyPURITY色譜柱上存留
強保留物質和大分子化合物在HyPURITY色譜柱中累積,對樣品中的化合物產生額外的保留行為,不僅引起峰型變寬、拖尾,使柱效下降,同時也會引起保留時間的變化,累積到一定程度時還會導致柱壓升高。由于強保留物質和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應,需要一定的時間才會體現出來,但對許多藥品特別是復雜樣品而言,很難判斷其是否是含有強保留物質,因此要防止強保留物質的累積,需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙氰清洗HyPURITY色譜柱。