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高效液相色譜柱出現(xiàn)堵塞要怎么辦?

更新時(shí)間:2021-11-03      點(diǎn)擊次數(shù):8368
  高效液相色譜柱以乙烯醇共聚物為基質(zhì)的色譜柱,即使其載炭量很高也能保持表面的濕潤。多孔結(jié)構(gòu)具有足夠大的平均孔徑,對(duì)小分子化合物、多肽和小分子蛋白能夠產(chǎn)生理想的分離效果。
 
  在有機(jī)溶劑比例較高的流動(dòng)相中,該柱具有與硅膠基質(zhì)色譜柱相同的柱效,但在堿性緩沖溶液為流動(dòng)相條件下,其分離效率則超過硅膠色譜柱。顯著的特點(diǎn)之一是基質(zhì)被烷基化的填料的洗脫順序,其保留能力與碳鏈長度成正比。
 
  高效液相色譜柱堵塞要怎么辦?
 
  如果是遇到堵塞的情況,先要確定堵塞是由于什么原因引起的,如果是由于色譜柱中殘留的緩沖鹽引起的,這是輕微的堵塞了,可以嘗試用高比例的水相在較高的溫度下沖洗色譜柱。
 
  如果是由于樣品原因?qū)е律V柱堵塞,又要考慮另外的辦法,如果是樣品中含有太多吸附性很強(qiáng)的物質(zhì)(有時(shí)是復(fù)雜樣品中的某些雜質(zhì),無法通過過濾離心等辦法去除)沉積吸附在柱頭導(dǎo)致堵塞,可以嘗試使用不同的溶劑(對(duì)此類物質(zhì)有較好溶解性的)慢慢沖洗。
 
  如果是由于樣品過濾不當(dāng)或者樣品在色譜柱上析出導(dǎo)致某些顆粒雜質(zhì)堵塞了色譜柱,除了嘗試尋找合適溶劑沖洗之外,只能考慮反沖了,通常,不建議反沖色譜柱,因?yàn)榭赡軐?duì)色譜柱造成較大損害,所以反沖是迫不得已的死馬當(dāng)活馬醫(yī)的辦法,一定要慎用。做好樣品的前處理并使用預(yù)柱或在線過濾器才是保護(hù)色譜柱的好辦法!

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